猪支原体肺炎又称喘气病或猪地方性流行性肺炎,是由猪肺炎支原体引起的一种接触性慢性呼吸道传染病。临床上以咳嗽、气喘和肺部典型的“虾肉”样病变为特征。猪支原体肺炎普遍存在于世界各地,具有高发病率和低死亡率的特点,是造成我国养猪业经济损失重要的疾病之一。不同年龄、性别、品种的猪均能感染,根据初步统计,该病阳性感染率大概为70%-90%,发病率至少40%以上。患猪生长不良,饲料转化率降低13.8%,生产率下降15.9%,极大增加养猪成本,使经济收入下降,估计我国每年由此病损失可达亿元以上。该病病死率虽不高,但其引发的继发性感染可出现严重死亡,造成的经济损失巨大。规模化猪场中猪肺炎支原体常和数种细菌、病毒等病原协同作用,而引起猪呼吸道疾病综合征,严重制约着养猪业的发展。本文主要从猪支原体肺炎疫苗的制备技术、免疫程序等方面对国内报批、销售的疫苗产品进行了综述。1猪支原体肺炎疫苗研究概况目前,市场上主要使用的猪支原体肺炎疫苗为常规全菌体疫苗。研究人员试图使用猪肺炎支原体主要抗原膜蛋白P97、P、P46和P36等,作为抗原制备具有一定保护率的的疫苗,但由于猪肺炎支原体特异保护性抗原的不确定性,并未获得成功的亚单位疫苗。常规的全体疫苗包括弱毒活疫苗及灭活疫苗,其中弱毒活疫苗需要胸腔、鼻腔或肺内注射,免疫期长,预防效果显著;灭活疫苗通过肌肉注射,临床使用方便,免疫效果良好,在我国临床上较经常使用。国外许多动物保健公司早在20世纪90年代就成功研制出猪支原体肺炎灭活疫苗,并投入市场,疫苗在仔猪7日龄和21日龄进行两次免疫接种。随后研制出的猪支原体肺炎单次免疫灭活疫苗,给临床上带来极大便利。我国从50年代起,各大科研院所开展了该病的疫苗研制工作,中国兽医药品监察所于年率先成功研制猪喘气病弱毒活疫苗,免疫保护达70%以上;年江苏省农科院和南京天邦成功注册肺内注射猪支原体肺炎活疫苗产品;年中监所拿到支原体喷鼻活疫苗国家发明专利,并于年拿到新兽药证书。近几年,随着养殖业的发展及科研力度的加强,国内对该疫病的防控也开展了广泛的研究,也相应进行了一些灭活疫苗的研究,并初步取得了一定的成果。2国内注册的猪支原体肺炎疫苗2.1基本情况2.1.1猪支原体肺炎活疫苗国内自主研发获得注册的产品有3个,分别为江苏省农科院畜牧兽医研究所研究开发的猪支原体肺炎活疫苗(株)、吉林正业(Z株)、中国兽医药品监察所研究开发的猪肺炎支原体活疫苗(RM48株)。猪肺炎支原体株是由江苏省农科院畜牧兽医研究所于年在甘肃省分离,经3次克隆化培养,无细胞培养代次,人工致弱的弱毒菌株,采用该菌株作为抗原制备成活疫苗。该疫苗可产生较强的局部黏膜免疫力和细胞免疫力,肺内1次注射,2周内可产生保护力。猪支原体肺炎活疫苗(RM48株)是由中国兽医药品监察所与齐鲁动物保健品有限公司等10家单位联合注册,该疫苗为冻干活疫苗,通过鼻腔或胸腔方式接种,1次免疫,能够有效预防猪支原体肺炎引起的猪喘气病。2.1.2猪支原体肺炎灭活疫苗由国内代理机构代为报批的进口灭活疫苗有6个。哈药集团“瑞倍适”系列产品使用的是新型佐剂爱菲金,该佐剂含有4.5%的矿物油,油滴细小,比传统油佐剂增加50%的吸附面积,具有更大的抗原结合面积,增强免疫应答;英特威“安百克”保留了15种猪肺炎支原体抗原蛋白,使用Emunade水包油佐剂;辉瑞“瑞富特”采用专利水质佐剂Carbopol,24h启动免疫,3d后产生有效保护;普泰克“喘泰克”为P株亚单位疫苗,免疫印迹证实抗原齐全、纯净,采用抗原浓缩技术,每次免疫仅需1.0mL,使用了非油质佐剂QS-21;勃林格“茵格发”为全球首创单针猪喘气病疫苗,使用专用佐剂“茵培莱”,具有最佳的生物降解性,免疫后无任何不良反应;海博莱以左旋咪唑和carbomer作为佐剂,左旋咪唑起免疫增强的作用,树脂起缓慢释放抗原作用,从而产生双重效力;梅里亚公司的猪肺炎支原体灭活疫苗采用抗原性好的猪肺炎支原体BQ14株及阻断支原体感染的菌膜蛋白抗原,双效抗原提升了疫苗保护力,采用可快速释放抗原的水性氢氧化铝胶作佐剂,应激小,对3日龄仔猪免疫注射依然安全,且能快速诱导机体产生抗体。
国内注册猪支原体肺炎疫苗产品菌株及佐剂详情如表1所示
2.2免疫程序及免疫持续期2.2.1猪支原体肺炎活疫苗
猪支原体肺炎活疫苗(株)采用肺内注射,由右侧肩胛后缘2cm肋间隙进针注射接种,每头接种1头份。仔猪5~7日龄免疫一次即可。强阳性猪场在60~80日龄二免,效果更好。疫苗正确接种一次,免疫后2周产生保护力,1个月抗同群感染,2个月抗强毒感染,免疫期长达6个月。猪支原体肺炎活疫苗(Z株)采用胸腔注射,从猪右侧胸腔肩胛骨后下缘沿猪体中轴线向后3-6厘米之间进针。如碰到肋骨,可将针头稍微向前或向后移动,一旦刺透胸壁即可注射。每头猪5毫升。猪支原体肺炎活疫苗(RM48株)通过鼻腔或胸腔方式接种,鼻腔接种2头份或猪胸腔接种1头份,免疫期为6个月。2.2.2猪支原体肺炎灭活疫苗肌肉注射,操作简便,可分为两针免疫和一针免疫。两针法免疫,一般免疫程序为1~2周龄首免,肌肉注射1.0~2.0mL,间隔2周后进行二免肌注1.0~2.0mL,免疫期为6~9个月;一针法免疫,免疫程序为1~3周龄或以上肌肉注射1.0~2.0mL疫苗,免疫持续期达4~6个月。一针法免疫需要较少的人力,应用更方便,免疫效果与两针免疫相当,目前应用较多。
2.3疫苗免疫效果评价
疫苗免疫保护效果主要从免疫攻毒保护、刺激产生细胞免疫和体液免疫水平等方面进行综合评价,其中肺炎病变评分与肺炎病变减少率是免疫效果评价的主要指标,也可以对疫苗产品主要经济指标生长性能方面进行比较。猪肺炎支原体的免疫应答主要以细胞免疫为主,局部粘膜免疫和被动免疫(如母源抗体)也证明了能抵御猪肺炎支原体感染,阻止肺炎病变的恶化,但目前未有研究表明猪支原体肺炎疫苗免疫效果与血清抗体水平具有相关性。各厂家生产的疫苗产品免疫攻毒试验均能显著降低肺炎病变,起到较好的免疫保护效果,有些疫苗产品还能显著提高动物生长性能,增加经济效益。但是目前疫苗产品对种母猪研究报道较少,妊娠后期疫苗接种一方面能降低支原体垂直传播可能性,另一方面能提高仔猪母源抗体水平抵御支原体感染。有研究表明,怀孕母猪在产仔前3~5周进行免疫,其仔猪断奶时肺炎支原体感染数量相对较少。Thackers等年对美国销售的勃林格“茵格发”、英特威“安百克”、普泰克“喘泰克”、辉瑞“瑞倍适”、富道“瑞富特”5个同类产品进行了免疫比较实验,结果表明5种疫苗产品免疫动物后,均能显著减少试验动物肺炎病变,各免疫组间肺炎病变率差异不显著。
3展望猪肺炎支原体能诱导呼吸道疾病继发感染,在猪呼吸综合征中扮演重要角色,有效控制猪肺炎支原体的感染,有利于减少呼吸综合征带来的经济损失。在许多国家,有超过70%的猪群使用猪支原体肺炎疫苗对该病进行防控。根据中国兽医药品监察所疫苗批签发的数量统计,我国该疫苗的使用率仅为30%左右。
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随着中国规模化养殖程度的上升,疾病控制水平的提高,生产成本控制理念的逐步深入,支原体疫苗在未来几年有望像圆环疫苗一样,成为新的常规疫苗。进口支原体疫苗一直以来占据着中国市场的极大份额,但国产疫苗一直没停下脚步,正逐步成长,市场份额近年稳步提高,市场占有率由年15%上升到目前31%。随着科技的进步,我们共同期待更多优秀的国内外动物疫苗厂家研发、生产出更加优质的猪支原体疫苗,造福我们的养猪业。
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